電泳儀是實(shí)現(xiàn)電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運(yùn)動速度不同,據(jù)此可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個組分提取制備。
電泳儀的原理
物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相等,故不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下,某些物質(zhì)分子會成為帶電的離子(或粒子),不同的物質(zhì),由于其帶電性質(zhì)、顆粒形狀和大小不同,因而在一定的電場中它們的移動方向和移動速度也不同,因此可使它們分離。
若溶液里一電量為Q的帶電粒子 ,在場強(qiáng)為E 的電場中以速度υ 移動,則它所受到的電場力F 應(yīng)為:
F =QE (6-1)
根據(jù)斯托克司定律,在液體中泳動的球狀粒子所受到的阻力F’為:
F’=6 ηrυ (6-2)
式中η為介質(zhì)的粘度系數(shù),r為粒子半徑。
當(dāng)二力平衡,即F =F’時 ,粒子作勻速泳動,且有
υ=QE/6 ηr (6-3)
影響電泳儀的外界因素
1、電場強(qiáng)度
2、溶液的pH值
3、溶液的離子強(qiáng)度
4、電滲作用
5、粒子的遷移率
6、吸附作用
注意事項(xiàng):
1. 電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2. 儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3. 由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點(diǎn)所需時間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進(jìn)行。
4. 在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5. 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6. 使用過程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。